一、 什么是PCR实验室

基因扩增实验室又称PCR实验室，其特点是能将微量的DNA大幅增加，PCR是分子微生物学研究和实验的常规方法，广泛应用于生物学各个领域，例如：检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的检测和诊断，DNA指纹、个体识别、亲子鉴别及法医物证，动、植物检疫，动物及其衍生产品检测，动物饲料、化妆品、食品卫生检测，转基因作物与转基因微生物检测等。

二、PCR实验室设计依据

国家关于PCR实验室建设及管理的现行规范和标准

《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》卫生部

《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》

《临床基因扩增检验实验室工作规范》

《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》卫办医政发（2010）194号

《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》

《生物安全实验室建筑技术规范》GB50346-2011

《生物安全通用要求》GB19489-2008

《洁净厂房设计规范》GB50073-2013

《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》WS233-2022

三、PCR实验室的设计

1、临床基因扩增检验实验室区域设计原则。

原则上临床基因扩增检验实验室应当设置以下区域：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。这4个区域在物理空间上必须是完全相互独立的，各区域无论是在空间上还是在使用中，应当始终处于完全的分隔状态，不能有空气的直接相通。根据使用仪器的功能，区域可适当合并。例如使用实时荧光PCR仪，扩增区、扩增产物分析区可合并；采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。各区的功能是：

1.1.试剂储存和准备区：贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的准备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。

1.2.标本制备区：核酸（RNA、DNA）提取、贮存及其加入至扩增反应管。对于涉及临床样本的操作，应符合生物安全二级实验室（BSL-2）防护设备、个人防护和操作规范的要求。

1.3.扩增区：DNA合成、DNA扩增及检测。

1.4.扩增产物分析区：扩增片段的进一步分析测定，如杂交、酶切电泳、变性高效液相分析、测序等。

四、PCR实验室空调通风系统设计及压力控制

1、临床基因扩增检验实验室的空气流向。临床基因扩增检验实验室的空气流向可按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区进行，防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。可按照从试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区方向空气压力递减的方式进行。可通过安装排风扇、负压排风装置或其他可行的方式实现。

2、PCR实验室应设计为负压洁净室，通过压差控制，使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染，并且降低扩增产物对人员和环境的污染。按照试剂单向流方向，各个实验室之间设计不同压力梯度来实现单向气流组织方向。

3、气流组织建议

3.1、气流组织采用上送下排，送风口和排风口布置应使室内气流停滞的空间降低到最小程度

3.2、在生物安全柜操作面或其他有气溶胶操作地点的上方附近不得设送风口

3.3、高效过滤器排室风口应设在内被污染最高的区域，单向布置，不得有障碍

3.4、不能以回（排）风夹墙代替风管支管，排风高效过滤器装置与排风总管的连接必须全部是实体风管。

 

4、PCR实验室室内设计参数

 

五、PCR实验室装修

1、实验室的墙体，包括顶棚，应结构牢固、气密性好；所有阴角宜采用圆弧形线条过度；墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒；（洁净板装修）

2、地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面，整体性好，便于进行清扫，耐腐蚀。没有条件的也可采用水磨石地面，或大块的瓷砖（大于或等于800mm）接缝需要小于2mm。

3、灯具要选用净化灯具（照度≥300Lux），能达到便于清洗、不积灰尘的特点。在四个实验区和四个缓冲区域顶部及传送窗内部安装有紫外灯≥1.5W/m³（WS/T 367-2012《医疗机构消毒技术规范》c6.3.1），供消毒用。在试剂准备区和样品制备区还设置移动紫外灯，对实验桌进行局部消毒。

4、试剂和标本通过机械连锁不锈钢传递窗传递，保证试剂和标本在传递过程中不受污染。

六、注意问题

1、几个区域的大小设置情况，应该是试剂准备区、产物扩增区、扩增分析区，要小一些；样品制备区应大一些，因为样品制备室要放置衣柜生物安全柜和一个低温冰箱。

2、试剂准备区、样品制备区设立紧急洗眼器，以备不时之需。

3、PCR实验室的洁净度可以依据用户的实际使用情况和资金的投入来设计。